YTHDF2 Double Nickase Plasmid (h2): sc-416408-NIC-2
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das YTHDF2 Double Nickase Plasmid (h2) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- YTHDF2 Double-Nickase-Plasmid (h2) und YTHDF2 Double-Nickase-Plasmid (h22) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf YTHDF2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
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| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
YTHDF2 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-416408-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das humane Gen YTHDF2 kodiert ein m6A-Reader-Protein, das selektiv an N6‑Methyladenosin‑modifizierte mRNAs bindet und deren Abbau fördert, wodurch es die Stabilität von Transkripten und die Translationsergebnisse maßgeblich beeinflusst. Durch die Rekrutierung von Deadenylierungs- sowie RNA‑Abbau-Maschinerien trägt YTHDF2 zur posttranskriptionellen Regulation in Prozessen wie Zellschicksalsentscheidungen, Stressantworten und Immun-Signalwegen bei. Eine fehlregulierte YTHDF2-Aktivität wurde mit veränderter epitranskriptomischer Kontrolle in der Krebsbiologie, bei Entzündungen und in Modellen viraler Infektionen in Verbindung gebracht, wobei Veränderungen der mRNA‑Eliminierung Genexpressionsprogramme umgestalten können. Das Genome Editing von YTHDF2 unterstützt mechanistische Studien des m6A‑abhängigen RNA‑Stoffwechsels, die Kartierung von Reader‑Target‑Netzwerken sowie die funktionelle Untersuchung von Signalwegen, die Proliferation, Differenzierung und die Regulation der angeborenen Immunität steuern.
YTHDF2 Das Double-Nickase-Plasmid (h2) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des YTHDF2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von YTHDF2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die YTHDF2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit YTHDF2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.