xCT Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-424104-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- xCTO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase xCT (m) e o Plasmídeo Double Nickase xCT (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Slc7a11. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
xCT Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-424104-NIC | 20 µg | $410.00 |
Slc7a11 codifica a xCT, a subunidade de cadeia leve do antiporte de cistina/glutamato do sistema x_c^-, que importa cistina extracelular em troca de glutamato intracelular. Ao fornecer cistina para a biossíntese de glutationa, a xCT sustenta o tamponamento redox celular e limita a peroxidação lipídica, ligando o Slc7a11 às respostas ao estresse oxidativo e à suscetibilidade à ferroptose. A atividade da xCT cruza-se com o transporte de aminoácidos, programas antioxidantes regulados por NRF2 e a homeostase do glutamato, influenciando a adaptação metabólica sob limitação de nutrientes. A expressão desregulada de Slc7a11 ou a atividade de transporte alterada têm sido associadas a mudanças na tolerância ao estresse em modelos de câncer, em contextos de neuroinflamação e em outras condições nas quais o desequilíbrio redox e vias de morte celular são desfechos experimentais centrais.
xCT O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Slc7a11 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Slc7a11. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Slc7a11. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Slc7a11 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.