Plasmide Double Nickase (h) WDR82: sc-406963-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) WDR82 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide WDR82 Double Nickase (h) et le plasmide WDR82 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant WDR82. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: WDR82 Antibody (A-2): sc-518243
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) WDR82 | sc-406963-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) WDR82 | sc-406963-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **WDR82** code une protéine contenant des répétitions WD, qui agit comme adaptateur régulateur au sein de complexes nucléaires contrôlant la transcription et l’état de la chromatine. WDR82 est surtout connue pour coupler l’état de phosphorylation du domaine C-terminal de l’ARN polymérase II au recrutement d’activités de modification des histones, notamment la machinerie de méthylation de H3K4, influençant ainsi la régulation génique à proximité des promoteurs. Par ces fonctions, elle contribue au traitement de l’ARN et à la fidélité transcriptionnelle dans des voies qui coordonnent les programmes d’expression génique au cours du cycle cellulaire et dans des contextes de différenciation. Le dérèglement du contrôle de la chromatine et de la transcription associé à WDR82 a été étudié en biologie du cancer et dans d’autres troubles liés à une régulation épigénétique aberrante.
WDR82 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus WDR82 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de WDR82. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de WDR82. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de WDR82.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.