VCAM-1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-400135-LAC

VCAM1 kodiert das vaskuläre Zelladhäsionsmolekül 1 (VCAM-1/CD106), einen induzierbaren Rezeptor der Immunglobulin-Superfamilie, der auf aktivierten Endothelzellen exprimiert wird und über die Bindung an Integrine wie VLA-4 (ITGA4/ITGB1) die feste Adhäsion und die Transmigration von Leukozyten vermittelt. Seine Expression wird durch entzündliche Signale über NF-κB‑ und zytokingesteuerte Programme stark hochreguliert und verknüpft dadurch die vaskuläre Aktivierung mit der Rekrutierung von Immunzellen, dem Umbau der endothelialen Barriere und Interaktionen mit der extrazellulären Matrix. VCAM-1 ist an Signalnetzwerken beteiligt, die während entzündlicher Antworten die Zytoskelettdynamik und Zell‑Zell‑Adhäsion koordinieren. Eine fehlregulierte VCAM1-Expression ist mit chronischer Entzündung und vaskulärer Dysfunktion assoziiert und wird häufig in Kontexten wie Atherosklerose, Autoimmunpathologie und tumorassoziiertem Endothel untersucht.

VCAM-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente VCAM1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

VCAM-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der VCAM1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen VCAM-1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen VCAM1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.