USP51 Plasmide Double Nickase (h): sc-414805-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- USP51 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il USP51 Double Nickase Plasmid (h) e il USP51 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira USP51. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
USP51 Plasmide Double Nickase (h) | sc-414805-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
USP51 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-414805-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
USP51 umano codifica un enzima deubiquitinante che rimuove l’ubiquitina dai substrati proteici, contribuendo al controllo ubiquitina-dipendente della stabilità proteica, della localizzazione subcellulare e della durata della segnalazione. Nell’ambito della rete regolatoria ubiquitina–proteasoma, USP51 è studiato in vie che coordinano la risposta al danno del DNA, i processi associati alla cromatina e la progressione del ciclo cellulare tramite ubiquitinazione e deubiquitinazione dinamiche. L’alterazione dell’attività delle deubiquitinasi può riconfigurare la proteostasi e la segnalazione della risposta allo stress, rendendo USP51 un nodo rilevante per indagare i meccanismi alla base di una manutenzione del genoma alterata e di programmi trascrizionali in stati cellulari associati alla malattia. L’analisi funzionale di USP51 supporta la ricerca su come l’editing dell’ubiquitina moduli il crosstalk tra vie di segnalazione e i fenotipi legati a un turnover proteico deregolato.
USP51 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus USP51 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di USP51. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di USP51. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con USP51 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.