USP2 Plasmide Double Nickase (h): sc-411243-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- USP2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il USP2 Double Nickase Plasmid (h) e il USP2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira USP2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
USP2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-411243-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
USP2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-411243-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
USP2 umano codifica la peptidasi 2 specifica per l’ubiquitina, un enzima deubiquitinante che rimuove catene di ubiquitina dalle proteine substrato per regolarne stabilità, localizzazione e output di segnalazione. USP2 partecipa alla proteostasi dipendente dall’ubiquitina e modula vie che controllano la progressione del ciclo cellulare, l’apoptosi, le risposte al danno del DNA e la segnalazione infiammatoria tramite deubiquitinazione selettiva di componenti delle vie. Modellando il turnover di regolatori chiave, USP2 influenza l’adattamento allo stress cellulare e l’omeostasi metabolica; la sua deregolazione è stata studiata in contesti quali la biologia tumorale, gli squilibri della segnalazione immunitaria e l’aggregazione proteica nelle malattie neurodegenerative. Queste proprietà rendono USP2 un nodo utile per interrogare la circuiteria dell’ubiquitina e il cross-talk tra vie di segnalazione nelle cellule umane.
USP2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus USP2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di USP2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di USP2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con USP2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.