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uPAR双切口酶质粒(h) | sc-400666-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
uPAR双切口酶质粒(h2) | sc-400666-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 PLAUR 基因编码尿激酶型纤溶酶原激活物受体(uPAR),这是一种通过 GPI 锚定于细胞表面的受体,能够富集 uPA 活性,从而促进纤溶酶生成并增强细胞周围的蛋白水解作用。uPAR 通过与玻连蛋白(vitronectin)以及整合素、FPR 家族成员等共受体相互作用,协调细胞外基质重塑、细胞黏附、迁移与侵袭相关信号传导,将蛋白酶活性与细胞骨架动态以及 MAPK/PI3K 相关通路连接起来。PLAUR/uPAR 表达失衡与炎症性重塑及肿瘤微环境生物学有关,在这些过程中,蛋白水解与细胞运动性的改变会促成疾病相关表型。作为细胞表面的关键枢纽调控因子,uPAR 常被用于研究转移性播散、血管生成以及免疫细胞转运等机制。
uPAR 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 PLAUR 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PLAUR内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏PLAUR的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了PLAUR基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。