UGT2B4 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-404208

Übersicht

UGT2B4 kodiert eine humane UDP-Glucuronosyltransferase, die die Glucuronidierung endogener Steroide und gallensäurebezogener Metaboliten sowie verschiedener Xenobiotika katalysiert und dadurch deren Löslichkeit für die Ausscheidung erhöht. Diese Phase‑II‑Konjugationsaktivität ist in hepatische und intestinale Entgiftungsnetzwerke eingebunden und steht in Wechselwirkung mit nukleären Rezeptor‑regulierten Signalwegen, die die metabolische Homöostase und chemische Stressantworten koordinieren. Unterschiede in der UGT2B4‑Expression oder ‑Aktivität können die Verarbeitung von Steroiden und Gallensäuren verschieben und die Clearance niedermolekularer Substrate verändern, was Expositions‑Wirkungs‑Beziehungen in der Pharmakologie beeinflusst. Entsprechend wird UGT2B4 im Kontext stoffwechselassoziierter Phänotypen und gewebespezifischer Unterschiede der Biotransformationskapazität untersucht.

Das UGT2B4 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des UGT2B4-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des UGT2B4-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von UGT2B4 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die UGT2B4-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von UGT2B4-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der UGT2B4-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf UGT2B4-Exone abzielen, die für die UGT2B4-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere UGT2B4-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom UGT2B4 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom UGT2B4 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des UGT2B4-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das UGT2B4 HDR-Plasmid (h) und UGT2B4 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von UGT2B4-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten UGT2B4-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.