Plasmide Double Nickase (h) Tyro3: sc-401412-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Tyro3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Tyro3 Double Nickase (h) et le plasmide Tyro3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TYRO3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Tyro3 Antibody (A-7): sc-166359
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Tyro3 | sc-401412-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Tyro3 | sc-401412-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **TYRO3** code Tyro3, une tyrosine kinase réceptrice de la famille TAM, activée par les ligands **GAS6** et **PROS1**, souvent en coopération avec la phosphatidylsérine présente à la surface des cellules apoptotiques. La signalisation de Tyro3 mobilise les voies **PI3K–AKT**, **MAPK/ERK** et **JAK/STAT** pour réguler la survie cellulaire, la prolifération, la migration et l’atténuation des réponses immunitaires innées, notamment via des effets sur l’élimination phagocytaire du matériel apoptotique. Dans le système nerveux, Tyro3 a été associé au soutien des neurones et à l’homéostasie synaptique, tandis que dans les contextes immunitaires, il contribue à la résolution de l’inflammation. Une activité ou une expression dérégulée de **TYRO3** a été associée à des programmes de signalisation oncogéniques, à des interactions tumeur–système immunitaire altérées, ainsi qu’à des phénotypes pertinents pour des maladies inflammatoires ou neurodégénératives.
Tyro3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TYRO3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TYRO3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TYRO3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TYRO3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.