TUSC2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-407062

Übersicht

TUSC2 (Tumorsuppressor-Kandidat 2), auch als FUS1 bekannt, kodiert ein kleines, mit Mitochondrien assoziiertes Protein, das an der Regulation der zellulären Homöostase beteiligt ist, einschließlich der Kontrolle reaktiver Sauerstoffspezies, der Kalziumsignalgebung und der stressinduzierten Apoptose. TUSC2 wird mit der Modulation kinasegetriebener Signalwege wie PI3K/AKT- und MAPK-Signalisierung in Verbindung gebracht und beeinflusst dadurch Proliferations- und Überlebensprogramme in Epithelzellen. Eine verringerte Expression oder ein funktioneller Verlust von TUSC2 wird in zahlreichen Tumorarten häufig beobachtet und ist mit veränderter mitochondrialer Funktion sowie dysregulierter Wachstumskontrolle assoziiert. Diese Eigenschaften machen TUSC2 zu einem nützlichen Ziel, um die Signalübertragung von den Mitochondrien zum Zellkern, oxidativen Stressantworten und für die Krebsbiologie relevante Signalwegabhängigkeiten zu untersuchen.

Das TUSC2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des TUSC2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des TUSC2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von TUSC2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die TUSC2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von TUSC2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der TUSC2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf TUSC2-Exone abzielen, die für die TUSC2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere TUSC2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom TUSC2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom TUSC2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des TUSC2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das TUSC2 HDR-Plasmid (h) und TUSC2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von TUSC2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten TUSC2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.