Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
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TUSC2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-407062
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TUSC2 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico TUSC2, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: TUSC2 Antibody (1550CT388.74.12): sc-517369
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TUSC2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-407062 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
TUSC2 (tumor suppressor candidate 2), noto anche come FUS1, codifica una piccola proteina associata ai mitocondri, implicata nella regolazione dell’omeostasi cellulare, incluso il controllo delle specie reattive dell’ossigeno, la segnalazione del calcio e l’apoptosi indotta da stress. TUSC2 è stato collegato alla modulazione di vie guidate da chinasi come la segnalazione PI3K/AKT e MAPK, influenzando i programmi di proliferazione e sopravvivenza nelle cellule epiteliali. Una ridotta espressione o la perdita funzionale di TUSC2 è frequentemente osservata in molteplici tipi di tumore ed è associata ad alterazioni della funzione mitocondriale e a un controllo della crescita deregolato. Queste proprietà rendono TUSC2 un bersaglio utile per analizzare la segnalazione mitocondrio-nucleo, le risposte allo stress ossidativo e le dipendenze di via rilevanti per la biologia del cancro.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO TUSC2 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene TUSC2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del TUSC2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto TUSC2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina TUSC2.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di TUSC2 per lo studio della segnalazione di TUSC2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni TUSC2 critici per la funzione di TUSC2
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di TUSC2 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal TUSC2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal TUSC2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus TUSC2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal TUSC2 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR TUSC2 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia TUSC2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio TUSC2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.