Plasmide Double Nickase (h) TSA-1: sc-408135-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TSA-1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TSA-1 Double Nickase (h) et le plasmide TSA-1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant LY6E. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TSA-1 | sc-408135-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) TSA-1 | sc-408135-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **LY6E (TSA-1)** code une protéine de surface cellulaire ancrée par **GPI**, appartenant à la famille **LY6/uPAR**, qui participe à l’organisation des microdomaines membranaires et à la modulation de la signalisation des récepteurs. TSA-1 a été associée à la régulation de l’activation des cellules immunitaires et des programmes induits par l’interféron, influençant des voies qui façonnent les réponses antivirales et la signalisation inflammatoire. En modifiant la transduction des signaux associée à la membrane plasmique, LY6E peut affecter la prolifération et la différenciation cellulaires, ainsi que la sensibilité à l’entrée de pathogènes. Une expression dérégulée de LY6E a été rapportée dans divers contextes pathologiques, notamment les cancers et des affections à médiation immunitaire, ce qui en fait une cible utile pour des études mécanistiques portant sur la défense de l’hôte et les réseaux de signalisation associés aux tumeurs.
TSA-1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus LY6E dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de LY6E. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de LY6E. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de LY6E.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.