Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
TRMT6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-412224
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- TRMT6 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico TRMT6, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TRMT6 Anticuerpo (F-3): sc-271752
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
TRMT6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-412224 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
TRMT6 codifica la subunidad catalítica del complejo metiltransferasa de tRNA (adenina(58)-N1), que se asocia con TRMT61A para instalar la modificación conservada m1A58 en los tRNA citosólicos. Esta modificación del ARN favorece la estabilidad estructural del tRNA, la decodificación precisa y una traducción eficiente, lo que vincula la actividad de TRMT6 con la proteostasis y las respuestas celulares al estrés. La alteración de la metilación del tRNA puede perturbar programas globales de traducción y se ha asociado con cambios en la proliferación y en las vías de mantenimiento del genoma en múltiples sistemas modelo. Por ello, TRMT6 se estudia en el contexto de la regulación epitranscriptómica del ARN, el control translacional y cambios relevantes para enfermedad en el crecimiento celular y la adaptación al estrés.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO TRMT6 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TRMT6 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TRMT6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TRMT6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TRMT6.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TRMT6 para la investigación de la señalización de TRMT6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de TRMT6 críticos para la función de TRMT6
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TRMT6 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido TRMT6 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TRMT6 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TRMT6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TRMT6 (h) y el plásmido HDR TRMT6 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TRMT6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TRMT6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.