Trap1a Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423500
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Trap1a O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Trap1a, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Trap1a Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423500 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Trap1a codifica uma chaperona mitocondrial da família HSP90 que sustenta a proteostase ao estabilizar e auxiliar no dobramento de proteínas clientes dentro da organela. Trap1a influencia a respiração mitocondrial, a homeostase de espécies reativas de oxigênio e a sinalização adaptativa ao estresse, integrando-se a vias que regulam a apoptose e a reprogramação metabólica. Ao modular a eficiência da fosforilação oxidativa e o controle de qualidade mitocondrial, Trap1a contribui para as respostas celulares à hipóxia, à limitação de nutrientes e ao estresse proteotóxico. A atividade desregulada de TRAP1 tem sido associada a alterações na bioenergética e na tolerância ao estresse observadas em múltiplos contextos relevantes para doenças, incluindo neurodegeneração e fenótipos metabólicos associados a tumores, tornando-o um alvo útil para estudos mecanísticos em modelos murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Trap1a (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Trap1a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Trap1a, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Trap1a na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Trap1a.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Trap1a para a investigação da sinalização de Trap1a, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Trap1a críticos para a função Trap1a
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Trap1a para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Trap1a Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Trap1a Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Trap1a. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Trap1a Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Trap1a (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Trap1a para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Trap1a definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.