TIG2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403443
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TIG2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TIG2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TIG2 Anticorpo (E-7): sc-373797
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TIG2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403443 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
RARRES2 codifica o gene 2 induzido por tazaroteno (TIG2), também conhecido como chemerina, uma adipocina secretada e quimioatraente que sinaliza principalmente por meio do CMKLR1 e de recetores relacionados para coordenar o tráfego de leucócitos e a vigilância imunitária dos tecidos. O TIG2 influencia cascatas inflamatórias, a diferenciação de adipócitos e a homeostase metabólica, ligando a biologia do tecido adiposo à sinalização imunitária inata e à função endotelial. A expressão desregulada de RARRES2/TIG2 tem sido associada à inflamação crónica e a distúrbios metabólicos e tem sido investigada em contextos como obesidade, resistência à insulina e fisiopatologia cardiovascular. Na biologia do cancro, a sinalização da chemerina é estudada pelos seus papéis na modelação do microambiente tumoral e na modulação do recrutamento de células imunitárias.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TIG2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RARRES2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RARRES2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RARRES2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TIG2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RARRES2 para a investigação da sinalização de TIG2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RARRES2 críticos para a função TIG2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RARRES2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TIG2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TIG2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RARRES2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TIG2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TIG2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RARRES2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RARRES2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.