Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
TIEG1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402480
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- TIEG1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico TIEG1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TIEG1 Anticuerpo (95-D): sc-130408
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
TIEG1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402480 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
KLF10 codifica TIEG1 (proteína 1 de respuesta temprana de crecimiento inducible por TGF-β), un factor de transcripción tipo Krüppel con dedos de zinc que integra la señalización de TGF-β/SMAD con un control dependiente del contexto de la progresión del ciclo celular, la diferenciación y la apoptosis. TIEG1 regula programas transcripcionales implicados en la remodelación de la matriz extracelular y el compromiso de linaje, y puede modular el diálogo cruzado con las vías de señalización MAPK y hormonales en contextos de células epiteliales, óseas e inmunitarias. La actividad alterada de KLF10/TIEG1 se ha asociado con respuestas fibróticas desreguladas, función aberrante de los osteoblastos y remodelación ósea, y cambios en redes transcripcionales supresoras de tumores, lo que lo hace relevante para estudios mecanísticos del control de la proliferación y la homeostasis tisular. Su papel como factor de respuesta temprana lo posiciona como un nodo útil para desentrañar la regulación génica dependiente del estímulo y el cableado de las vías aguas abajo.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO TIEG1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen KLF10 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del KLF10 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de KLF10 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TIEG1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en KLF10 para la investigación de la señalización de TIEG1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de KLF10 críticos para la función de TIEG1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de KLF10 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido TIEG1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TIEG1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus KLF10. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TIEG1 (h) y el plásmido HDR TIEG1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología KLF10 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana KLF10 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.