Tesmin CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-410474

Übersicht

TESMIN (auch bekannt als MTL5) kodiert Tesmin, ein metallothioneinähnliches Protein, das eine wichtige Rolle bei der Homöostase von Metallionen sowie bei zellulären Antworten auf Zink und andere zweiwertige Kationen spielt. Tesmin wurde mit der Regulation von Transkriptionsprogrammen und zellzyklusassoziierten Prozessen in Verbindung gebracht; zudem wurden Dynamiken der nukleären Lokalisation beschrieben, die auf eine kontextabhängige Kontrolle der Genexpression hindeuten. Veränderte TESMIN/MTL5-Expression wurde in mehreren Krebsdatensätzen beobachtet und mit proliferativen Phänotypen korreliert, was seine Relevanz für die Tumorbiologie und Stressanpassungswege unterstreicht. Als metallbindendes Protein, das mit dem Redoxgleichgewicht und zellulären Differenzierungszuständen verknüpft ist, ist Tesmin von Interesse, um zu untersuchen, wie Metallsignale mit Wachstumskontrolle und genomischer Stabilität zusammenwirken.

Das Tesmin CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des TESMIN-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des TESMIN-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von TESMIN nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Tesmin-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von TESMIN-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Tesmin-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf TESMIN-Exone abzielen, die für die Tesmin-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere TESMIN-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Tesmin CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Tesmin CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des TESMIN-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Tesmin HDR-Plasmid (h) und Tesmin HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von TESMIN-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten TESMIN-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.