Plasmide CRISPR/Cas9 KO TBL1XR1 (h): sc-401998

Présentation

TBL1XR1 (transducin β-like 1 X-linked receptor 1) code un corégulateur contenant des répétitions WD40, qui fonctionne au sein des complexes de répression transcriptionnelle NCoR/SMRT et participe à un échange dynamique entre répression et activation au niveau des régions promotrices et des enhancers. Il relie la machinerie régulatrice associée à la chromatine à des programmes transcriptionnels dépendants des signaux, notamment les voies en aval des récepteurs nucléaires et de la signalisation Wnt/β-caténine, influençant ainsi les décisions de destinée cellulaire, la prolifération et la différenciation. Par ses rôles dans le contrôle transcriptionnel et le recrutement de cofacteurs, TBL1XR1 a été impliqué dans des états transcriptionnels oncogéniques ainsi que dans des phénotypes neurodéveloppementaux rapportés par des études génétiques. La perturbation de TBL1XR1 peut donc être utilisée pour étudier la régulation des gènes dépendante de la chromatine, la stabilité des réseaux transcriptionnels et le dialogue entre voies de signalisation dans des modèles cellulaires humains.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO TBL1XR1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène TBL1XR1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du TBL1XR1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert TBL1XR1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine TBL1XR1.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en TBL1XR1 pour l'étude de la signalisation de TBL1XR1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de TBL1XR1 essentiels à la fonction de TBL1XR1
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de TBL1XR1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le TBL1XR1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le TBL1XR1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus TBL1XR1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le TBL1XR1 plasmide HDR (h) et le TBL1XR1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie TBL1XR1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles TBL1XR1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.