Plasmide Double Nickase (m) TBK1: sc-425191-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) TBK1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TBK1 Double Nickase (m) et le plasmide TBK1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Tbk1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TBK1 Antibody (A-6): sc-398366
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) TBK1 | sc-425191-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) TBK1 | sc-425191-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Tbk1** code la kinase 1 se liant à TANK (**TBK1**), une kinase sérine/thréonine qui intègre les signaux de l’immunité innée et du stress en phosphorylant IRF3/IRF7 et en modulant des programmes transcriptionnels liés à NF-κB. TBK1 agit en aval des voies des récepteurs de reconnaissance de motifs (PRR), notamment cGAS–STING et RIG-I/MAVS, pour déclencher les réponses aux interférons de type I et la défense antivirale ; elle intervient aussi dans l’autophagie sélective et la mitophagie via des protéines adaptatrices telles qu’OPTN et SQSTM1. Au-delà de la défense de l’hôte, la signalisation TBK1 influence l’homéostasie métabolique et des réseaux de signalisation inflammatoire fréquemment étudiés dans des modèles de neuroinflammation et de neurodégénérescence. Une activité ou un dosage de TBK1 dérégulé a été associé à des phénotypes immunitaires et neurodégénératifs, faisant de **Tbk1** un nœud clé pour des études mécanistiques dans des cellules murines.
TBK1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Tbk1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Tbk1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Tbk1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Tbk1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.