TAUT CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-402918

概要

SLC6A6はタウリントランスポーターTAUTをコードしており、TAUTはナトリウムおよび塩化物依存性の膜輸送体として、浸透圧恒常性、カルシウム制御、ならびに酸化ストレスや小胞体（ER）ストレスに対する細胞保護に必要な細胞内タウリン貯蔵量を維持します。TAUTを介したタウリン取り込みは、ミトコンドリア機能、膜の安定化、そして興奮性・非興奮性組織を問わず細胞の生存、分化、体積調節に影響するシグナル伝達過程を支えます。SLC6A6の活性やタウリンの利用可能性の変化は、網膜、心臓、腎臓、神経組織などの系における細胞ストレス感受性や機能障害と関連づけられており、神経生物学、心代謝制御、炎症性ストレス応答の研究において重要です。溶質キャリア（SLC）輸送ネットワークの一部として、TAUTはイオン勾配、レドックス恒常性、ストレス適応的な遺伝子プログラムを制御する経路と交差します。

TAUT CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSLC6A6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SLC6A6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SLC6A6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TAUTタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TAUTシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SLC6A6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TAUTの機能に不可欠なSLC6A6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SLC6A6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TAUT CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTAUT CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SLC6A6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TAUT HDRプラスミド（h）および TAUT HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSLC6A6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSLC6A6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。