TAP2 Plasmide Double Nickase (h): sc-404218-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TAP2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il TAP2 Double Nickase Plasmid (h) e il TAP2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira TAP2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TAP2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404218-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TAP2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404218-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TAP2 (transporter associato al processamento dell’antigene 2) codifica una subunità di trasportatore della famiglia ABC (ATP-binding cassette) che forma un eterodimero con TAP1 per traslocare peptidi derivati dal proteasoma dal citosol al reticolo endoplasmatico. Questo passaggio di trasporto è essenziale per il caricamento dei peptidi sulle molecole MHC di classe I e la successiva presentazione dell’antigene alle cellule T CD8+, collegando TAP2 alla più ampia via di processamento e presentazione dell’antigene. Un’alterata funzione di TAP2 può rimodellare l’immunopeptidoma e influenzare la sorveglianza immunitaria modificando la quantità e il repertorio dei complessi MHC I–peptide esposti in superficie. Difetti genetici o cambiamenti regolatori di TAP2 sono stati associati a una ridotta espressione di MHC di classe I e a fenotipi di evasione immunitaria rilevanti per infezioni, disturbi infiammatori e immunobiologia dei tumori.
TAP2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TAP2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TAP2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TAP2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TAP2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.