TAP CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-424683

개요

마우스 Nxf1는 TAP를 암호화하며, TAP는 보존된 RNA 결합 수출 수용체로서 NXT1과 짝을 이루어 핵공 복합체를 통해 핵에서 세포질로 대량의 mRNA를 수송합니다. TAP는 TREX 같은 어댑터 복합체와의 상호작용을 통해 성숙한 메신저 리보핵단백질(mRNP) 입자를 인식하고, 전사·스플라이싱·3′ 말단 처리와 핵 수출을 연결하는 데 기여합니다. 번역에 이용 가능한 전사체의 공급을 조절함으로써 Nxf1는 단백질 항상성, 세포 주기 진행, 스트레스 반응성 유전자 발현 프로그램에 영향을 미칩니다. mRNA 수출 기계의 교란은 암 생물학에서의 비정상적 유전자 발현, 그리고 신경발달 및 신경퇴행성 질환 기전과 연관되어 있어, Nxf1는 RNA 대사 관련 병리 연구에 유용한 연구 노드입니다.

TAP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Nxf1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Nxf1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Nxf1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 TAP 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 TAP 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Nxf1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• TAP 기능에 중요한 Nxf1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Nxf1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• TAP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 TAP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Nxf1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  TAP HDR 플라스미드 (m) 및 TAP HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Nxf1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Nxf1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.