Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Tafazzin Double Nickase Plasmid (h): sc-403588-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Tafazzin Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Tafazzin Double-Nickase-Plasmid (h) und Tafazzin Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf TAZ abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Tafazzin: sc-365810
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Tafazzin Double Nickase Plasmid (h) | sc-403588-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Tafazzin Double Nickase Plasmid (h2) | sc-403588-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TAZ kodiert Tafazzin, eine mit der inneren Mitochondrienmembran assoziierte Acyltransferase, die Cardiolipin umgestaltet, um die für die Organisation der Atmungskette und eine effiziente oxidative Phosphorylierung erforderliche Acylkettenzusammensetzung aufrechtzuerhalten. Über die Reifung von Cardiolipin unterstützt Tafazzin die Architektur der mitochondrialen Cristae, die Membrandynamik und die Stabilität von Proteinsuperkomplexen, die am Elektronentransport beteiligt sind. Eine Störung von TAZ beeinträchtigt die Phospholipid-Homöostase, erhöht den Monolysocardiolipin-Spiegel und kann den zellulären Energiestoffwechsel in Richtung von Stressantworten verschieben, die mit einer eingeschränkten Mitochondrienfunktion verknüpft sind. Eine TAZ-Fehlfunktion ist stark mit dem Barth-Syndrom assoziiert und wird häufig im Zusammenhang mit Kardiomyopathie, Skelettmyopathie, Neutropenie sowie allgemeineren Defekten des mitochondrialen Lipid-Remodelings untersucht.
Tafazzin Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des TAZ-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von TAZ abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die TAZ-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit TAZ-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.