T-type Ca⁺⁺ CP α1H CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-401147

개요

CACNA1H는 CaV3.2 T형 칼슘 채널의 기공 형성 서브유닛인 α1H를 암호화하며, 막 흥분성, 박동원(pacemaker) 활동, 그리고 칼슘 의존적 유전자 조절을 형성하는 저전압 활성화 Ca2+ 유입을 매개합니다. 역치 이하(subthreshold) 진동과 세포내 Ca2+ 일시적 변동(transient)을 조절함으로써 CaV3.2는 신경전달물질 방출, 호르몬 분비, 활동 의존적 전사 프로그램에 영향을 주는 신호전달 과정에 통합됩니다. CACNA1H 기능 변화는 간질 감수성, 신경병증성 통증 기전, 심장 리듬 관련 표현형 등 흥분성 이상 장애와 연관되어 왔으며, 암세포의 증식과 생존 맥락에서도 연구되고 있습니다. 흥분성 신호 네트워크에서 결절(nodal) 역할을 하는 이온 채널로서 CACNA1H는 칼슘 유입 의존적 경로와 채널 구성(channelome) 재편을 규명하기 위해 자주 분석 대상이 됩니다.

T-type Ca++ CP α1H CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CACNA1H 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CACNA1H 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CACNA1H의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 T-type Ca++ CP α1H 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 T-type Ca++ CP α1H 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CACNA1H 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• T-type Ca++ CP α1H 기능에 중요한 CACNA1H 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CACNA1H 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• T-type Ca++ CP α1H CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 T-type Ca++ CP α1H CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CACNA1H 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  T-type Ca++ CP α1H HDR 플라스미드 (h) 및 T-type Ca++ CP α1H HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CACNA1H 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CACNA1H 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.