Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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T-bet/TBX21 Double Nickase Plasmid (h): sc-400480-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das T-bet/TBX21 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- T-bet/TBX21 Double-Nickase-Plasmid (h) und T-bet/TBX21 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf TBX21 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: T-bet/TBX21: sc-21749
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
T-bet/TBX21 Double Nickase Plasmid (h) | sc-400480-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
T-bet/TBX21 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-400480-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TBX21 kodiert T-bet, einen T-Box-Transkriptionsfaktor, der Typ‑1‑Immunprogramme koordiniert, indem er die IFNG-Expression fördert und die Festlegung auf die Th1-Linie verstärkt, während er alternative T‑Helfer-Schicksale antagonisiert. T-bet integriert Signale nachgeschaltet von Zytokin- und Antigenrezeptor-Signalwegen, darunter IL‑12/STAT4 und IFN‑γ/STAT1, um die Chromatinzugänglichkeit und transkriptionelle Netzwerke in CD4+- und CD8+-T‑Zellen sowie NK‑Zellen zu prägen. Durch die Kontrolle von Effektor-Differenzierung, zytotoxischer Funktion und dem Gleichgewicht inflammatorischer Zytokine wird TBX21 in Kontexten chronischer Infektionen, der Tumorimmunbiologie und immunvermittelter entzündlicher Erkrankungen breit untersucht. Eine dysregulierte TBX21-Aktivität oder -Expression wurde mit aberranter Immunpolarisierung und veränderter Gewebeentzündung in Verbindung gebracht und macht TBX21 zu einem nützlichen Knotenpunkt für mechanistische Studien der Immunregulation.
T-bet/TBX21 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des TBX21-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von TBX21 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die TBX21-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit TBX21-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.