Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Superoxide Dismutase 1/SOD1 Double Nickase Plasmid (m): sc-423069-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Superoxide Dismutase 1/SOD1 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Superoxide Dismutase 1/SOD1 Double-Nickase-Plasmid (m) und Superoxide Dismutase 1/SOD1 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Sod1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Superoxide Dismutase 1/SOD1: sc-271014
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Superoxide Dismutase 1/SOD1 Double Nickase Plasmid (m) | sc-423069-NIC | 20 µg | $410.00 |
Das murine Gen **Sod1** kodiert die Superoxiddismutase 1 (SOD1), ein zytosolisches, Cu/Zn-abhängiges antioxidatives Enzym, das die Dismutation von Superoxidradikalen zu Wasserstoffperoxid und Sauerstoff katalysiert und dadurch oxidative Schäden an Proteinen, Lipiden und Nukleinsäuren begrenzt. Die SOD1-Aktivität ist in zelluläre Signal- und Regulationswege der Redoxhomöostase eingebunden, darunter das Glutathionsystem sowie Katalase-/Peroxiredoxin-Systeme, und beeinflusst unter oxidativem Stress die Mitochondrienfunktion, die Proteostase und inflammatorische Signalgebung. Eine fehlregulierte SOD1-Funktion oder Aggregation wurde umfassend im Kontext von Neurodegeneration und der Vulnerabilität von Motoneuronen untersucht; zudem wird eine veränderte **Sod1**-Expression zur Modellierung oxidativer Schädigung bei Alterung, metabolischem Stress und Toxikantexposition eingesetzt. Daher ist **Sod1** ein häufiges Ziel für mechanistische Studien zur Handhabung reaktiver Sauerstoffspezies (ROS), zur Stressantwort-Signalgebung und zu nachgeschalteten, schädigungsassoziierten Signalwegen.
Superoxide Dismutase 1/SOD1 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Sod1-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Sod1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Sod1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Sod1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.