SULT1C4 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-417528

Übersicht

SULT1C4 kodiert eine zytosolische Sulfotransferase, die die Übertragung von Sulfat von 3′-Phosphoadenosin-5′-phosphosulfat (PAPS) auf Hydroxyl- und aminhaltige Substrate katalysiert und dadurch sulfatierte Metaboliten mit veränderter Löslichkeit und Bioaktivität erzeugt. Diese Phase-II-Konjugationsreaktion trägt zur Entgiftung von Xenobiotika sowie zur Modulation endogener Signalmoleküle bei und greift in übergeordnete zelluläre Netzwerke ein, die das Redoxgleichgewicht, die Hormonantwort und die Metaboliten-Clearance steuern. Unterschiede in der Sulfotransferase-Aktivität können das metabolische Schicksal von Umweltchemikalien und Arzneistoffen beeinflussen, wodurch SULT1C4 für Studien zu interindividuellen Unterschieden in der Chemikaliensensitivität und zum gewebespezifischen Stoffwechsel relevant ist. Eine dysregulierte Sulfatierungskapazität wurde in der Literatur außerdem mit veränderter Expositionsbiologie und krankheitsassoziierten metabolischen Phänotypen in Verbindung gebracht, was die Nutzung von SULT1C4 als funktionellen Knotenpunkt in stoffwechselzentrierter Forschung unterstützt.

Das SULT1C4 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des SULT1C4-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des SULT1C4-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von SULT1C4 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SULT1C4-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von SULT1C4-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SULT1C4-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf SULT1C4-Exone abzielen, die für die SULT1C4-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere SULT1C4-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom SULT1C4 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom SULT1C4 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des SULT1C4-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SULT1C4 HDR-Plasmid (h) und SULT1C4 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von SULT1C4-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten SULT1C4-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.