SULT1A1 Plasmide Double Nickase (h): sc-417793-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SULT1A1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SULT1A1 Double Nickase Plasmid (h) e il SULT1A1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SULT1A1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: SULT1A1 Antibody (214E2Z): sc-517645
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SULT1A1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-417793-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SULT1A1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-417793-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La SULT1A1 umana codifica una sulfotransferasi citosolica che catalizza la coniugazione con solfato di xenobiotici fenolici, ormoni endogeni e diverse piccole molecole, modificandone così solubilità, biodisponibilità e clearance. Questo enzima del metabolismo di Fase II partecipa ai processi di detossificazione chimica e di bioattivazione generando esteri solfatici che, a seconda del contesto del substrato, possono facilitare l’escrezione oppure creare intermedi reattivi. L’attività di SULT1A1 si integra con reti più ampie di risposta agli xenobiotici e con l’equilibrio redox attraverso la regolazione coordinata delle vie di coniugazione e della gestione dei metaboliti. Le variazioni nell’espressione o nella funzione di SULT1A1 sono state studiate in relazione alle differenze interindividuali nel metabolismo di farmaci e cancerogeni e nella suscettibilità allo stress cellulare indotto da agenti chimici.
SULT1A1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SULT1A1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SULT1A1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SULT1A1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SULT1A1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.