SSSCA1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406804

Übersicht

SSSCA1 (Sjögren-Syndrom/Sclerodermie-Autoantigen 1) kodiert ein konserviertes nukleäres Protein, das ursprünglich als Autoantigen bei systemischen Autoimmunerkrankungen identifiziert wurde. Obwohl seine molekularen Funktionen noch nicht vollständig geklärt sind, weisen die verfügbaren Daten auf eine Beteiligung von SSSCA1 an der nukleären Homöostase, an Protein-Protein-Interaktionen sowie an zellulären, stressresponsiven Prozessen hin, die die Genregulation und die Zellzykluskontrolle beeinflussen. Eine veränderte Expression oder immunologische Erkennung von SSSCA1 wurde in Zusammenhängen beschrieben, die für Autoimmunität und die Krebsbiologie relevant sind, was es zu einem nützlichen Ziel macht, um Mechanismen aberranter nukleärer Regulation zu untersuchen. Die Erforschung von SSSCA1 unterstützt Untersuchungen auf Signalweg-Ebene dazu, wie nukleäre Proteine zu immunassoziierter Pathologie und fehlregulierten Wachstumsprogrammen beitragen.

Das SSSCA1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des SSSCA1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des SSSCA1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von SSSCA1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SSSCA1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von SSSCA1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SSSCA1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf SSSCA1-Exone abzielen, die für die SSSCA1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere SSSCA1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom SSSCA1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom SSSCA1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des SSSCA1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SSSCA1 HDR-Plasmid (h) und SSSCA1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von SSSCA1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten SSSCA1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.