SPARC Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-423101-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SPARCO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SPARC (m) e o Plasmídeo Double Nickase SPARC (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Sparc. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SPARC Anticorpo (AON-1): sc-33645
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SPARC Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-423101-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SPARC Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-423101-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Sparc codifica a SPARC (secreted protein acidic and rich in cysteine), uma glicoproteína matricelular que modula a montagem da matriz extracelular (MEC) e as interações célula–matriz, em vez de atuar como um componente estrutural da MEC. Em tecidos de camundongo, a SPARC influencia a fibrilogênese do colágeno, a dinâmica das adesões focais e a biodisponibilidade de fatores de crescimento, integrando-se a vias que regulam migração celular, proliferação e remodelamento tecidual. A atividade de SPARC é frequentemente associada ao reparo de feridas, a contextos de sinalização angiogênica e a programas de remodelamento fibrótico, por meio de efeitos sobre a organização do estroma e a rigidez da matriz. A expressão alterada de SPARC tem sido associada a mudanças no comportamento do microambiente tumoral, ao remodelamento inflamatório e a fenótipos de fibrose de órgãos em modelos experimentais, tornando-a um alvo útil para estudar mecanismos de doença impulsionados pela MEC.
SPARC O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Sparc em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Sparc. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Sparc. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Sparc interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.