Sp1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423094

Descripción general

Sp1 (proteína 1 de especificidad) es un factor de transcripción con dedos de zinc expresado de manera ubicua que se une a elementos promotores ricos en GC para regular la transcripción basal e inducible en diversos programas génicos. En células de ratón, Sp1 integra señales de las vías MAPK/ERK, PI3K/AKT y rutas sensibles al estrés para coordinar la progresión del ciclo celular, las respuestas al daño del ADN, la remodelación de la cromatina y la homeostasis metabólica. Mediante interacciones con correuladores como p300/CBP y complejos de HDAC, Sp1 ayuda a modular la salida transcripcional de genes implicados en proliferación, apoptosis y diferenciación. La actividad desregulada de Sp1 se ha relacionado con redes transcripcionales oncogénicas, señalización inflamatoria y cambios en la expresión génica asociados a la neurodegeneración, lo que lo convierte en un nodo clave para estudios mecanísticos del control transcripcional.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Sp1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Sp1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Sp1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Sp1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Sp1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Sp1 para la investigación de la señalización de Sp1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Sp1 críticos para la función de Sp1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Sp1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Sp1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Sp1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Sp1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Sp1 (m) y el plásmido HDR Sp1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Sp1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Sp1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.