Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Snapin CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406317
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Snapin Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im Snapin-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Snapin: sc-514675
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Snapin CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) | sc-406317 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
SNAPIN kodiert Snapin, ein kleines zytosolisches Protein, das mit der SNARE-Maschinerie und Tethering-Komplexen assoziiert und so Vesikel-Docking sowie regulierte Exozytose unterstützt, insbesondere in Neuronen und neuroendokrinen Zellen. Snapin wird mit der Priming-Phase synaptischer Vesikel, der calciumgekoppelten Neurotransmitterfreisetzung sowie mit Endosom-/Lysosom-assoziiertem Transport in Verbindung gebracht, indem es über Interaktionen Membranfusionsereignisse koordiniert. Durch seinen Einfluss auf synaptische Transmission und intrazellulären Transport wird SNAPIN häufig in Signalwegen untersucht, die für neuronale Konnektivität, Autophagie-Lysosom-Funktion und stressresponsive Signalübertragung relevant sind. Veränderte, Snapin-abhängige Transportprozesse wurden im Kontext neuroentwicklungsbedingter und neurodegenerativer Krankheitsmechanismen untersucht, bei denen Vesikeltransport und Proteostase gestört sind.
Das Snapin CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des SNAPIN-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des SNAPIN-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von SNAPIN nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Snapin-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von SNAPIN-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Snapin-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf SNAPIN-Exone abzielen, die für die Snapin-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere SNAPIN-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom Snapin CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Snapin CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des SNAPIN-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Snapin HDR-Plasmid (h) und Snapin HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von SNAPIN-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten SNAPIN-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.