Skint8 Lentiviral Activation Particles (m2): sc-437039-LAC-2

マウスのSkint8（selection and upkeep of intraepithelial T cells protein 8：上皮内T細胞の選択と維持に関与するタンパク質8）は、上皮の免疫調節に関与するとされるbutyrophilin-like/Skintファミリーの一員であり、皮膚などのバリア組織においてT細胞の選択や維持を形成する役割を担う可能性が示唆されている。Skintタンパク質は一般に、細胞間相互作用や抗原受容体依存的なシグナル伝達プログラムと関連し、胸腺および末梢におけるリンパ球の分化に影響を与えることで、組織常在性免疫の恒常性維持に寄与すると考えられる。Skintファミリー経路の制御異常は、皮膚炎症、上皮表面での宿主防御、免疫監視機構の研究において重要である。したがってSkint8は、上皮—免疫クロストークの解明、組織常在性T細胞の発生・分化を規定するシグナルのマッピング、ならびにバリア関連の免疫調節ネットワークが炎症表現型に及ぼす影響をマウスモデルで検討するための遺伝子編集標的として有用である。

Skint8 レンチウイルス活性化粒子（m2）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なSkint8の発現上昇を可能にします。

Skint8 レンチウイルス活性化粒子（m2）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、Skint8転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性Skint8の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のSkint8ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。