Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SDHC CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-405559
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- SDHC Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im SDHC-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: SDHC: sc-515102
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
SDHC CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) | sc-405559 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
SDHC kodiert die Succinat-Dehydrogenase-Komplex-Untereinheit C, eine integrale Membrankomponente des mitochondrialen Komplexes II, die das Enzym an der inneren Mitochondrienmembran verankert und den Elektronentransfer von Succinat auf Ubichinon unterstützt. Durch seine Rolle an der Schnittstelle zwischen Tricarbonsäure(TCA)-Zyklus und oxidativer Phosphorylierung trägt SDHC zur Funktion der Atmungskette, zum mitochondrialen Redoxgleichgewicht und zum zellulären Energiestoffwechsel bei. Eine Störung der Integrität des SDH-Komplexes kann die Succinatverwertung verändern und nachgeschaltete Signalwege beeinflussen, die mit metabolischer Umprogrammierung und Stressantworten verknüpft sind. Eine SDHC-Dysfunktion wurde mit Mechanismen mitochondrialer Erkrankungen und mit Tumorprädispositions-Biologie in Zusammenhang gebracht und ist damit relevant für die Untersuchung stoffwechselgetriebener Phänotypen und der mitochondrialen Qualitätskontrolle.
Das SDHC CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des SDHC-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des SDHC-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von SDHC nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SDHC-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von SDHC-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SDHC-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf SDHC-Exone abzielen, die für die SDHC-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere SDHC-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom SDHC CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom SDHC CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des SDHC-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SDHC HDR-Plasmid (h) und SDHC HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von SDHC-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten SDHC-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.