Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SDF-4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422857
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SDF-4 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SDF-4, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SDF-4 Anticorpo (E-12): sc-393930
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SDF-4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422857 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Sdf4 codifica o fator 4 derivado de células estromais (SDF-4), uma proteína residente no retículo endoplasmático (RE) implicada na homeostase do cálcio e na função da via secretora. O SDF-4 está associado ao controlo de qualidade do RE e a processos de tráfego proteico que influenciam o transporte vesicular e as respostas celulares ao stress. Através destas funções, o Sdf4 pode afetar programas de sinalização ligados à comunicação celular dependente de secreção e à homeostase tecidular. A desregulação do manuseamento de cálcio no RE e da proteostase é relevante para mecanismos subjacentes à disfunção metabólica, à neurodegeneração e a fenótipos inflamatórios, tornando o Sdf4 um nó útil para estudos focados em vias.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SDF-4 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Sdf4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Sdf4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Sdf4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SDF-4.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Sdf4 para a investigação da sinalização de SDF-4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Sdf4 críticos para a função SDF-4
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Sdf4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SDF-4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SDF-4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Sdf4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SDF-4 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SDF-4 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Sdf4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Sdf4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.