Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Sam 68 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-422795
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Sam 68 Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im Sam 68-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Sam 68: sc-514468
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Sam 68 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) | sc-422795 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
Khdrbs1 kodiert das RNA-bindende Protein Sam68 (KHDRBS1), einen Regulator der STAR-Familie der posttranskriptionellen Genexpression, der Signaltransduktion mit dem RNA-Stoffwechsel koppelt. Sam68 bindet spezifische RNA-Elemente, um alternatives Spleißen, mRNA-Export, -Stabilität und -Translation zu steuern, und ist an dynamischen Ribonukleoproteinkomplexen beteiligt, einschließlich stressgranula-assoziierter Signalwege. Über phosphorylierungsabhängige Interaktionen mit Kinasen der Src-Familie und anderen Signalnetzwerk-Knoten beeinflusst Sam68 Zellzyklusprogression, Apoptose und Differenzierungsprogramme. Eine Fehlregulation des durch KHDRBS1/Sam68 vermittelten Spleißens und der RNA-Prozessierung wurde mit onkogenem Signaling, neuroentwicklungsbezogenen Phänotypen und immunassoziierten Transkriptionszuständen in Verbindung gebracht, was seine breite Nutzbarkeit für mechanistische Studien unterstreicht.
Das Sam 68 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Khdrbs1-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Khdrbs1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Khdrbs1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Sam 68-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Khdrbs1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Sam 68-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf Khdrbs1-Exone abzielen, die für die Sam 68-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere Khdrbs1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom Sam 68 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Sam 68 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Khdrbs1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Sam 68 HDR-Plasmid (m) und Sam 68 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Khdrbs1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Khdrbs1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.