Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
S-100A16 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-426783
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- S-100A16 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico S-100A16, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:S-100A16 Anticorpo (G-7): sc-390151
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
S-100A16 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-426783 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene murino S100a16 codifica a S-100A16, uma pequena proteína ligante de cálcio do tipo EF-hand da família S100, que modula a sinalização dependente de cálcio e interações proteína–proteína. A S-100A16 está associada à regulação da organização do citoesqueleto, da motilidade celular e das respostas ao estresse celular, com funções relatadas em programas de diferenciação e na remodelação da rede de actina. Por meio de interações com nós de sinalização que influenciam processos associados a MAPK e às GTPases Rho, a S-100A16 pode afetar a dinâmica de adesão e os outputs transcricionais. A expressão desregulada de S100A16 tem sido associada à remodelação patológica de tecidos e a fenótipos oncogênicos em múltiplos contextos, tornando-a um alvo útil para estudos mecanísticos de vias relacionadas à proliferação, migração e inflamação.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO S-100A16 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene S100a16 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do S100a16, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do S100a16 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína S-100A16.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de S100a16 para a investigação da sinalização de S-100A16, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) S100a16 críticos para a função S-100A16
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos S100a16 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo S-100A16 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo S-100A16 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus S100a16. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo S-100A16 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR S-100A16 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia S100a16 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo S100a16 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.