RXRβ CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-422768

Übersicht

Rxrb kodiert den Retinoid-X-Rezeptor beta (RXRβ), einen ligandenaktivierten nukleären Rezeptor, der mit zahlreichen Partnern – darunter PPARs, LXRs, FXR, VDR und RARs – Heterodimere bildet, um Transkriptionsprogramme zu steuern, die den Lipid- und Glukosestoffwechsel, die Zelldifferenzierung und entzündliche Signalwege kontrollieren. RXRβ integriert retinoide und lipidabgeleitete Signale, um die chromatinassoziierte Transkription an Antwortelementen zu modulieren, und beeinflusst dabei die mitochondriale Funktion sowie das oxidative Gleichgewicht in metabolisch aktiven Geweben. In Mausmodellen wurde eine veränderte Rxrb-Aktivität mit einer gestörten metabolischen Homöostase und Immunmodulation in Verbindung gebracht, was es für Studien zu Steatose, Insulinsensitivität und Mechanismen entzündlicher Erkrankungen relevant macht. Seine zentrale Rolle in der wechselseitigen Regulation nukleärer Rezeptoren positioniert RXRβ zudem als Knotenpunkt, um Signalweg-Interaktionen in Entwicklung und endokriner Signalübertragung zu untersuchen.

Das RXRβ CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Rxrb-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Rxrb-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Rxrb nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die RXRβ-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Rxrb-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der RXRβ-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Rxrb-Exone abzielen, die für die RXRβ-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Rxrb-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom RXRβ CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom RXRβ CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Rxrb-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das RXRβ HDR-Plasmid (m) und RXRβ HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Rxrb-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Rxrb-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.