Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
RhoB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400875
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RhoB O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico RhoB, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RhoB Anticorpo (C-5): sc-8048
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RhoB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400875 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
RHOB codifica a RhoB, uma pequena GTPase prenilada da família Rho que regula a dinâmica do citoesqueleto de actina, o tráfego endocítico e a renovação de recetores de membrana. A RhoB alterna entre estados ligados a GDP e a GTP para modular nós de sinalização associados à adesão celular, migração, transporte vesicular e respostas ao stress, com ligações funcionais a vias como Rho/ROCK e a processos mais amplos influenciados por MAPK e PI3K. Ao contrário de GTPases Rho estreitamente relacionadas, a RhoB encontra-se enriquecida em membranas endossomais e é frequentemente induzida por stress celular, posicionando-se como um mediador-chave da compartimentalização de sinais. Alterações na expressão ou atividade de RHOB têm sido associadas a fenótipos relacionados com cancro, sinalização inflamatória e biologia vascular, tornando-o relevante para estudos mecanísticos de proliferação, invasão e sinalização mediada por recetores.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO RhoB (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RHOB em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RHOB, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RHOB na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína RhoB.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RHOB para a investigação da sinalização de RhoB, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RHOB críticos para a função RhoB
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RHOB para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo RhoB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo RhoB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RHOB. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo RhoB Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR RhoB (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RHOB para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RHOB definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.