Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
RHBDL6 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-404212
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- RHBDL6 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在RHBDL6基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
RHBDL6 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-404212 | 20 µg | $397.00 |
概述
RHBDF2 编码 RHBDL6，这是一种属于菱形蛋白酶（rhomboid）家族的膜内丝氨酸蛋白酶，定位于细胞内膜系统，并参与对膜相关底物的受调控蛋白水解。RHBDL6 的活性与蛋白质质量控制、胞内转运以及信号组分的周转有关，并与内质网相关降解（ERAD）及应激适应程序相整合，从而塑造细胞蛋白稳态（proteostasis）。通过这些机制，RHBDL6 可影响生长因子与炎症信号的输出，包括与 EGFR 配体可用性以及先天免疫调控相关的通路。菱形蛋白酶介导的加工过程一旦失调，已在肿瘤生物学与炎症性疾病模型中与信号网络的病理性重塑相关联，因此有必要在疾病相关背景下进一步研究 RHBDL6 依赖的蛋白水解作用。
RHBDL6 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中RHBDF2基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对RHBDF2基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏RHBDF2开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使RHBDL6蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建RHBDF2缺失的细胞模型，用于RHBDL6信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 RHBDL6 功能至关重要的 RHBDF2 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 RHBDF2 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 RHBDL6 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 RHBDL6 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 RHBDF2 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 RHBDL6 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 RHBDL6 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由RHBDF2同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定RHBDF2靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。