RBM15B Double Nickase Plasmid (h): sc-412040-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das RBM15B Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- RBM15B Double-Nickase-Plasmid (h) und RBM15B Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf RBM15B abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
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| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
RBM15B Double Nickase Plasmid (h) | sc-412040-NIC | 20 µg | $410.00 |
RBM15B (RNA-Bindungsmotiv-Protein 15B) ist ein nukleäres RNA-bindendes Protein, das an der posttranskriptionellen Genregulation beteiligt ist, einschließlich der Kontrolle der prä‑mRNA‑Prozessierung und der mRNA‑Stabilität durch Interaktionen mit der Spleiß- und RNA-Überwachungsmaschinerie. Als Mitglied der RBM15-Familie wird es mit der Regulation des Transkript-Schicksals in Verbindung gebracht und kann epitranskriptomische Signalnetzwerke beeinflussen, die den RNA-Stoffwechsel modulieren. Veränderte RNA-Prozessierung und eine dysregulierte Aktivität RNA-bindender Proteine sind wiederkehrende Merkmale bei Krebs sowie bei neuroentwicklungsbedingten und immunbezogenen Erkrankungen, was RBM15B zu einem hilfreichen Knotenpunkt für die Analyse krankheitsrelevanter Genexpressionsprogramme macht. Studien zur Perturbation von RBM15B helfen dabei, RNA-regulatorische Schaltkreise zu kartieren, die Zellproliferation, Differenzierung und Stressantworten beeinflussen.
RBM15B Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des RBM15B-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von RBM15B abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die RBM15B-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit RBM15B-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.