QPCT CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-405768

개요

QPCT(글루타미닐-펩타이드 사이클로트랜스퍼레이스)는 분비되며 골지체와 연관된 효소로, 단백질과 펩타이드의 N-말단에 피로글루탐산(pyroglutamate)을 형성하는 반응을 촉매합니다. 이는 단백질 번역 후 수식(post-translational modification)의 하나로, 단백질 분해에 대한 안정성, 수용체 상호작용, 그리고 펩타이드의 생물학적 활성에 영향을 줄 수 있습니다. QPCT는 N-말단의 글루타민 또는 글루탐산 잔기를 피로글루탐산으로 전환함으로써 분비 경로 내에서 단백질 성숙에 기여하고, 세포외 신호전달 환경을 조절합니다. 이러한 활성은 펩타이드 호르몬 및 신경펩타이드 처리, 세포외 단백질 항상성(proteostasis), 조절된 분비를 관장하는 경로들과 교차합니다. 문헌에서는 피로글루탐산화(pyroglutamylation)의 변화가 단백질 응집 및 신경퇴행과 연관된 펩타이드 변형과 연결된다고 보고되어 왔으며, 이는 QPCT가 질환 관련 프로테오폼(proteoform) 생물학을 연구하는 데 있어 기전적 결절점(mechanistic node)이 될 수 있음을 뒷받침합니다.

QPCT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 QPCT 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 QPCT 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 QPCT의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 QPCT 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 QPCT 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 QPCT 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• QPCT 기능에 중요한 QPCT 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 QPCT 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• QPCT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 QPCT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 QPCT 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  QPCT HDR 플라스미드 (h) 및 QPCT HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 QPCT 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 QPCT 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.