PSM Lentiviral Activation Particles (h): sc-401947-LAC

FOLH1 kodiert das prostataspezifische Membranantigen (PSM), eine Typ-II-transmembrane Zink-Metallopeptidase mit Folathydrolase- und NAALADase-Aktivität, die die extrazelluläre Folatverarbeitung und die glutamaterge Signalübertragung reguliert. Das Protein beeinflusst die Nährstoffaufnahme und den Neurotransmitterstoffwechsel, indem es poly-γ-glutamierte Folate sowie N‑Acetylaspartylglutamat spaltet, und verknüpft damit die Verfügbarkeit von Aminosäuren mit der synaptischen Homöostase. Die FOLH1-Expression ist im Prostataepithel stark angereichert und wird in Studien zur Prostatabiologie широко als molekularer Marker verwendet, während seine enzymatische Aktivität in neuronalen Geweben Untersuchungen zur exzitatorischen Neurotransmission und zu neuroinflammatorischen Prozessen unterstützt. Eine fehlregulierte Expression und Aktivität von FOLH1/PSM wurde mit der Biologie des Prostatakarzinoms sowie mit Signalwegen in Verbindung gebracht, die für Neurodegeneration und für das Remodeling des tumorassoziierten Mikromilieus relevant sind.

PSM Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente FOLH1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

PSM Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der FOLH1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen PSM-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen FOLH1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.