PRMT5 Lentiviral Activation Particles (h): sc-401115-LAC

PRMT5 kodiert die Protein-Arginin-Methyltransferase 5, eine wichtige Typ-II-Methyltransferase, die die symmetrische Dimethylierung von Argininresten an Histonen und zahlreichen Nicht-Histon-Substraten katalysiert. Durch die Regulation der Chromatinzugänglichkeit, transkriptioneller Programme und des RNA-Spleißens beeinflusst PRMT5 zentrale Prozesse wie Zellzyklusprogression, DNA-Schadensantworten, Ribosomenbiogenese und die Expression von Genen, die mit Stammzelleigenschaften assoziiert sind. Die PRMT5-Aktivität ist in epigenetische und Signalnetzwerke eingebunden, darunter MYC-getriebene Transkription, Modulation des p53-Signalwegs und die Assemblierung des Spleißosoms über die Methylierung von Sm-Proteinen. Eine dysregulierte PRMT5-Expression oder -Funktion wurde in mehreren Tumorkontexten mit veränderter Proliferation, Lineage-Festlegung und onkogener Transformation in Verbindung gebracht, was PRMT5 als mechanistischen Knotenpunkt für die Untersuchung epigenetischer Kontrolle krankheitsrelevanter Phänotypen stützt.

PRMT5 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente PRMT5-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

PRMT5 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der PRMT5-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen PRMT5-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen PRMT5-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.