Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PMPCA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406691
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PMPCA O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PMPCA, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PMPCA Anticorpo (B-8): sc-390471
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PMPCA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406691 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PMPCA codifica a subunidade alfa da peptidase de processamento mitocondrial (MPP), uma metaloprotease heterodimérica que cliva presequences N-terminais de direcionamento mitocondrial de proteínas codificadas no núcleo após a importação para a matriz mitocondrial. Por meio dessa etapa de maturação, PMPCA dá suporte à montagem e à função dos complexos de fosforilação oxidativa, à proteostase mitocondrial e a programas mais amplos de metabolismo energético ligados à biogênese mitocondrial. A interrupção da atividade de PMPCA pode prejudicar a maturação de proteínas mitocondriais, alterar o desempenho da cadeia respiratória e desencadear respostas de estresse celular que se cruzam com a apoptose e a reprogramação metabólica. Variantes em PMPCA têm sido associadas a doenças mitocondriais com fenótipos de neurodesenvolvimento e neurodegeneração, tornando-o relevante para estudos mecanísticos de disfunção mitocondrial.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PMPCA (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PMPCA em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PMPCA, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PMPCA na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PMPCA.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PMPCA para a investigação da sinalização de PMPCA, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PMPCA críticos para a função PMPCA
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PMPCA para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PMPCA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PMPCA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PMPCA. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PMPCA Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PMPCA (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PMPCA para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PMPCA definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.