PLC β1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-401141

개요

PLCB1은 포스포리파아제 C 베타 1(PLCβ1)을 암호화하며, PLCβ1은 G 단백질에 의해 조절되는 효과기 효소로서 포스파티딜이노시톨 4,5-비스포스페이트(PIP2)를 가수분해해 이노시톨 1,4,5-삼인산(IP3)과 디아실글리세롤(DAG)을 생성합니다. 이를 통해 세포 내 Ca2+를 동원하고 단백질 키나아제 C(PKC) 신호전달을 활성화합니다. 이 경로는 GPCR로부터의 입력을 통합하여 신경세포 흥분성, 시냅스 신호전달, 분비, 세포골격 역학 등 다양한 과정을 조절합니다. 또한 PLCβ1 활성은 하위 MAPK 및 칼슘 의존적 전사 프로그램에 기여하여, 막 수용체 신호를 유전자 발현과 세포 상태 변화로 연결합니다. PLCB1 발현 또는 신호전달의 변화는 신경정신과적 표현형 및 비정상적인 성장 조절 신호와 연관된 것으로 보고되어, 신호전달 기전 연구 및 질환 관련 세포 모델에서의 활용을 뒷받침합니다.

PLC β1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 PLCB1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PLCB1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PLCB1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PLC β1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PLC β1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PLCB1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PLC β1 기능에 중요한 PLCB1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PLCB1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PLC β1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 PLC β1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PLCB1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PLC β1 HDR 플라스미드 (h) 및 PLC β1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PLCB1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PLCB1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.