Pin1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400485-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Pin1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Pin1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Pin1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PIN1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Pin1 Anticorpo (G-8): sc-46660
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Pin1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400485-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Pin1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400485-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano **PIN1** codifica a proteína Pin1, uma isomerase peptidil-prolil cis/trans dependente de fosforilação que reconhece motivos Ser/Thr-Pro e catalisa mudanças conformacionais que controlam a estabilidade, a localização e a saída de sinalização das proteínas. A Pin1 integra sinais de quinases direcionadas por prolina e modula vias centrais para a progressão do ciclo celular, a regulação transcricional, as respostas a danos no DNA e a sinalização de estresse por meio de substratos como ciclina D1, c-Myc, p53 e tau. Ao remodelar conformações de fosfoproteínas, a Pin1 influencia a degradação mediada por ubiquitina e o controle de checkpoints, conectando a dinâmica de fosforilação à proteostase. A atividade desregulada de PIN1 tem sido associada a programas de sinalização oncogênica e a processos neurodegenerativos, tornando-a um nó amplamente utilizado em estudos mecanísticos de regulação dirigida por fosforilação.
Pin1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PIN1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PIN1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PIN1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PIN1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.