Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO PGRP-S (m): sc-423451
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- PGRP-S Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique PGRP-S, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PGRP-S Antibody (G-1): sc-365304
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO PGRP-S (m) | sc-423451 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Pglyrp1 code la protéine de reconnaissance du peptidoglycane S (PGRP-S), une molécule sécrétée de reconnaissance de motifs (pattern-recognition) qui se lie au peptidoglycane bactérien et contribue à la surveillance immunitaire innée. Chez la souris, PGRP-S aide à moduler les réponses antimicrobiennes et la signalisation inflammatoire au niveau des muqueuses et à l’échelle systémique, en influençant l’activation des leucocytes et les voies de détection des microbes. Une activité altérée de la famille des PGRP a été associée à une dérégulation des interactions hôte–microbe, à une susceptibilité accrue aux infections et à des phénotypes inflammatoires pertinents pour les tissus barrières. Pglyrp1 est donc étudié dans le contexte de l’homéostasie de l’immunité innée, de l’immunité dépendante du microbiome et de modèles de maladies associées à l’inflammation.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO PGRP-S (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Pglyrp1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Pglyrp1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Pglyrp1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine PGRP-S.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Pglyrp1 pour l'étude de la signalisation de PGRP-S, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Pglyrp1 essentiels à la fonction de PGRP-S
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Pglyrp1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le PGRP-S plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le PGRP-S plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Pglyrp1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le PGRP-S plasmide HDR (m) et le PGRP-S (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Pglyrp1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Pglyrp1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.