Pepsin C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404137

Visão geral

PGC codifica a pepsina C, uma endopeptidase aspártica (gastricsina) secretada como zimogénio e ativada em condições ácidas para participar na proteólise gástrica. No estômago, a pepsina C contribui para a digestão luminal de proteínas e para o processamento de péptidos, atuando em redes de proteases dependentes de acidez que complementam a atividade da pepsina A. Alterações na expressão de PGC e nos padrões de secreção de pepsina C têm sido usadas como indicadores de mudanças na diferenciação da mucosa gástrica e na homeostase epitelial. A desregulação de programas de proteases gástricas é frequentemente examinada no contexto da remodelação inflamatória e da transformação neoplásica do trato gastrointestinal superior, sustentando estudos mecanísticos em modelos celulares gástricos e em sistemas derivados de tecidos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Pepsin C (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PGC em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PGC, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PGC na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Pepsin C.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PGC para a investigação da sinalização de Pepsin C, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PGC críticos para a função Pepsin C
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PGC para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Pepsin C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Pepsin C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PGC. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Pepsin C Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Pepsin C (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PGC para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PGC definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.