Pax-8 Lentiviral Activation Particles (h): sc-401757-LAC

PAX8 kodiert Pax-8, einen Paired-Box-Transkriptionsfaktor, der für die Festlegung der Zelllinie und die Differenzierung in Schilddrüsenfollikelzellen, im renalen Epithel und in Müller-Gang-abgeleiteten Geweben erforderlich ist. Pax-8 reguliert Genprogramme, die die epitheliale Identität, die Organogenese und die Hormonbiosynthese steuern, einschließlich transkriptioneller Netzwerke für schilddrüsenspezifische Gene und entwicklungsbiologischer Signalwege. Veränderte PAX8-Expression oder Fusionsereignisse werden mit Tumorentstehung in der Schilddrüse und im renalen Kontext in Verbindung gebracht, während Keimbahnstörungen mit kongenitaler Hypothyreose und urogenitalen Entwicklungsdefekten assoziiert sind. In Zellmodellen beeinflusst die PAX8-Aktivität Chromatinzustände und transkriptionelle Schaltkreise, die Proliferation, Differenzierung und metabolische Outputs prägen.

Pax-8 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente PAX8-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Pax-8 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der PAX8-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Pax-8-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen PAX8-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.