Date published: 2026-7-12

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P2Y2双切口酶质粒(m): sc-422096-NIC

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说明书
  • 针对种属:mouse
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • P2Y2 双切口酶质粒(m)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • P2Y2双切酶质粒(m)和P2Y2双切酶质粒(m2)编码针对P2ry2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:P2Y2: sc-518121,通过WB, IF或者IHC分析
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    产品名称产品编号规格价格数量收藏夹

    P2Y2双切口酶质粒(m)

    sc-422096-NIC
    20 µg
    $410.00

    P2Y2双切口酶质粒(m2)

    sc-422096-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    小鼠 P2ry2 基因编码 P2Y2 受体,这是一种 G 蛋白偶联的嘌呤能受体,可被细胞外 ATP 和 UTP 激活,并主要与 Gq/11 偶联,从而刺激磷脂酶 C(PLC)、触发 IP3 依赖的钙离子动员以及 PKC/MAPK 信号通路。P2Y2 调控上皮离子与液体转运、黏液纤毛清除和机械转导,并在多种组织中影响细胞骨架重塑、细胞迁移和细胞因子产生。通过这些途径,P2Y2 参与先天免疫信号与炎症反应,因此在气道生物学、血管重塑以及组织损伤与修复模型研究中具有重要意义。在实验体系中,涉及 P2Y2 的嘌呤能信号失衡也被用于研究慢性炎症与纤维化,以及肿瘤微环境和转移过程等情境。

    P2Y2 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 P2ry2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对P2ry2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏P2ry2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了P2ry2基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。